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OVTOKO 人卵巢癌細胞

OVTOKO 人卵巢癌細胞

簡要描述:細胞基本屬性
細胞名稱 OVTOKO 人卵巢癌細胞
細胞別稱 OVTOKO
商品貨號 XY-H1036
種屬來源 人
年齡性別 女性
組織來源 卵巢
生長特性 貼壁生長
細胞形態 上皮細胞樣
細胞規格 1×10^6cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

產品型號: XY-H1036

所屬分類:人細胞系

更新時間:2025-12-31

詳細說明:

OVTOKO 人卵巢癌細胞
一、細胞基本屬性
細胞名稱
OVTOKO 人卵巢癌細胞
細胞別稱
OVTOKO
商品貨號
XY-H1036
種屬來源
年齡性別
女性
組織來源
卵巢
生長特性
貼壁生長
細胞形態
上皮細胞樣
背景簡介
-
生物安全等級
-
細胞規格
1×10^6cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測
培養基
RPMI1640 +10% fetal bovine serum
培養條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲存
倍增時間
~24-30小時

 

二、細胞接收后的處理
1) 收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。
2) 請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。
3) 貼壁細胞:細胞在室溫中放置1h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的丸全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4) 細胞運輸途中脫落操作方法:把脫落的細胞收集離心后棄上清,用PBS清洗一遍,離心棄上清,在離心管中加入1ml一酶吹散消化20秒左右,加培養基終止消化后離心重新鋪平,剩下的貼壁細胞就按照正常貼壁細胞傳代方法操作。
5) 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。

 

三、胞培養操作
1) 復蘇細胞:以下細胞培養凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養基,培養過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
a) 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。          
b) 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培養瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。
c) 輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養液后吹勻。          
d) 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中,置于培養箱中培養。
貼壁細胞傳代注意點:
一定要PBS洗一遍。
細胞多觀察幾次掌握時間,不要在細胞沒有基本脫落就終止消化然后吹打下來,這樣細胞  更容易分化和死亡。
不要一直對細胞吹打
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a) 收集細胞及細胞培養液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數。
b) 根據細胞數量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度1×10^6~1×10^7/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c) 將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
四、培養注意事項
1) 細胞出現問題,予以重發情況
a) 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、瓶身破損、培養液嚴重漏液等,重發;
b) 細胞污染問題,請在收到產品3 天內,給我們提出真實的實驗結果,核實后重發;
c) 常溫發貨的細胞靜置2小時后,干冰凍存發貨的細胞復蘇后2 天后,絕大多數細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態照片),重發;
d) 干冰凍存發貨的細胞復蘇后2天后或常溫發貨的細胞靜置2 小時候并且未開封,出現污染,重發;
e) 細胞活性問題,請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,和每天的細胞照片,核實后予重發;
f) 細胞收到當天以及第2,3 天請拍照,3 天未告知的,視為產品合格。4-7 天內出現問題需提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題的照片以及細胞相關操作的詳細步驟,并跟技術人員溝通的,由技術人員判定為我方責任的,重發。 
2) 細胞出現問題,不予以重發的情況
a) 客戶操作造成細胞污染,不重發;
b) 客戶嚴重操作失誤致細胞狀態不好,不重發;
c) 非我們推薦細胞培養體系致的細胞狀態不好,不重發;
d) 細胞狀態不好,未提供真實清晰的培養前3 天的細胞狀態照片,不重發;
e) 細胞培養時經其它處理導致細胞出現問題的,不重發;
f) 收到細胞并發現問題與客服人員溝通的時間證明大于7 天的,不重發;
g) 視具體情況而定
五、注意事項
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。
3. 該細胞僅供科研使用!說明書僅供參考以實際到貨說明書為準!


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